黃-嘌呤氧化酶（XOD）測(cè)定試劑盒

(比色法）

一、測(cè)定意義：

黃-嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase XOD)主要存在于哺

乳動(dòng)物的乳汁及肝脾中，屬需氧脫氫酶類，是體內(nèi)核酸代

謝中的重要酶，在肝細(xì)胞損傷時(shí)，此酶早于 SGPT 釋放于

血清中，并且升高明顯，其對(duì)鑒別肝細(xì)胞性黃疸及阻塞性

黃疸有明顯的測(cè)定意義，并且在缺氧過程中黃-嘌呤脫氫酶

很快形成黃-嘌呤氧化酶，其對(duì)自由基的產(chǎn)生起了重要作用。

二、測(cè)試原理：

XOD 可催化次黃-嘌呤生成黃-嘌呤，與此同時(shí)產(chǎn)生超

氧陰離子自由基，當(dāng)有電子受體及顯色劑存在的情況下，

生成紫紅色結(jié)合物，根據(jù)后者生成量的多少可以推算出

XOD 的活力。

三、試劑組成與配制：（50 管/48 樣）

試劑一：液體 20mL×3 瓶，-20℃以下冷凍保存 3 個(gè)月，用

時(shí)根據(jù)需要量取出室溫融化或 37℃水浴融化。

試劑二：液體 5mL×1 瓶，4℃冰箱保存 6 個(gè)月。

試劑三：黃色液體 6mL×2 瓶, 4℃避光保存 3 個(gè)月。

試劑四：粉劑×2 支，稀釋液 0.6mL×2 支， -20℃以下冷凍

保存 6 個(gè)月，臨用前取 4 號(hào)稀釋液 0.6mL 稀釋 4

號(hào)粉劑一支，稀釋好的 4 號(hào)試劑-20℃以下冰箱或

冰室保存。盡量避免反復(fù)凍溶。(注:試劑四粉劑

本身量較少,可能會(huì)附著于管壁或蓋子內(nèi)(并非空

管),可 4000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 2 分鐘后再用稀釋液溶

解)

試劑五：終止液 60mL×1 瓶，4℃冰箱保存 6 個(gè)月。

四、操作步驟：

1、樣本前處理：

①、血清(漿)：

血清可直接取樣進(jìn)行檢測(cè)；血漿需以 3000～3500 轉(zhuǎn)/

分，離心 10 分鐘，小心吸取澄清的上清進(jìn)行檢測(cè)。若仍

有混濁可反復(fù)離心；

②、紅細(xì)胞：

抗凝全血以 1000 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，棄上層血清，

取下層紅細(xì)胞按 1︰49 的比例加雙蒸水制成溶血液待測(cè)。

配好的溶血液最好當(dāng)天做檢測(cè)，4℃存放時(shí)間不超過 8 小

時(shí)；

③、組織：

準(zhǔn)確稱取組織重量，按重量(g):體積(mL)=1:9 的比例

加入 9 倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦 0.86%或 0.9%的生理鹽

水 ), 冰 水 浴 條 件 下 , 機(jī) 械 勻 漿 , 制 備 成 10% 的 勻 漿

液,2500～3000 轉(zhuǎn)/分鐘,離心 10 分鐘,取上清液進(jìn)行測(cè)定。

五、參考取樣量（a*）：

血清 50～100μL；1︰49 溶血液 50μL；10%肝組織勻漿

20μL～100μL。

七、注意點(diǎn)：

1、試劑一、試劑四放-20℃保存，盡量避免反復(fù)凍溶，如要

多次使用，請(qǐng)?jiān)诘谝淮谓鈨觯ɑ蛟噭┧呐浜茫┖蠓盅b好

再保存。

2、組織塊要用生理鹽水漂洗后，濾紙吸干，-20℃以下可保

存 3 個(gè)月以上。

3、血漿中 XOD 的檢測(cè)：血漿在檢測(cè)過程中易引起混濁，需

在測(cè)試前以 3000～3500 轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，小心吸取

澄清的上清，棄去上層脂肪與下層沉淀，若仍有混濁可

反復(fù)離心。

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