明膠酶譜檢測試劑盒

簡介：

基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)以無活性的酶原形式分泌，活化后能夠降解細胞外基質的膠原蛋白，又稱膠原酶。通過影響細胞外基質，膠原酶參與胚胎發育、形態發生、組織重塑等過程，并參與炎癥、腫瘤、心血管、神經等許多疾病過程。血漿與組織中的MMP-2、MMP-9參與各種生理與病理過程，其在診斷和治療中的意義日益受到重視。

明膠酶譜法是一種新型的蛋白質分析方法，它可以提供準確的蛋白質質量分析和分子量分析結果。明膠酶譜法可以快速有效地測定蛋白質中的氨基酸和糖基化激酶的活性。這種方法通

過使用蛋白質，核酸和其他復合物構成的聚合物，結合相關的酶誘發反應，來分析蛋白質的質量和分子量。這些復合物可以在單獨的氨基酸片段中用來測量激酶反應，從而識別活性位點，反映了蛋白質質量和分子量分析的結果。

明膠酶譜法的原理是基于膠質酶結合物，它由多種蛋白質，核酸和其他復合物組成，使用酶

誘發反應來分析蛋白質的質量和分子量。該方法由激酶和聚合物組成，它們分別催化了激酶和聚合物的反應，從而產生了激酶的活性。此外，該方法還能夠測量氨基酸片段的活性，這將有助于評估蛋白質的質量和分子量。

檢測目的:

本試劑盒用于檢測MMP-2、MMP-9 酶譜及活性（Detect MMP2 and MMP9 as low as 1nM）

檢測原理：

本試劑盒采用酶譜法(Zymography)檢測MMP-2、MMP-9 活性。Zymography 是一種廣為使用的、基于SDS-PAGE 電泳和反相凝膠染色的蛋白酶檢測方法，其靈敏度可達1 nM，高于ELISA方法，其基本原理1和程序是：制備加有膠原酶底物的SDS-PAGE 凝膠，含蛋白酶的樣品在此凝膠中進行電泳，電泳結束后取出凝膠與酶反應Buffer 孵育，凝膠染色與脫色。凝膠中由于含底物蛋白而被深染，形成深色背景，但在有蛋白酶條帶的位置，蛋白酶將降解凝膠中的底物蛋白，因而不被染色而形成透亮區域，從而能同時指示MMP-2、MMP-9的大小位置(酶譜)及活性。本試劑盒提供MMP-2、MMP-9 特異蛋白底物及酶學反應緩沖液，可檢測少至0.1~0.5 μl 血液中的MMP-2、MMP-9 酶譜及活性，檢測靈敏度~1nM。試劑盒可進行50次標準小膠檢測，如果小膠加樣孔為10~15個，則總計可檢測500~750個樣品。

試劑盒組成與儲存:

A. 2 x SDS-PAGE non-reducing buffer 1.5 ml, -20℃保存

B.10 x Substrate G, 50 ml,-20℃保存:

C.10 x Buffer A,50 ml,4℃保存,使用時用蒸餾水稀釋

D.10 x Buffer B,50 ml,4 ℃保存,使用時用蒸餾水稀釋:

E.SDS-PAGE 凝膠蛋白質考馬斯亮藍染色液,50ml,4℃保存

注意事項

1.10 mM EDTA能夠抑制MMP活性

2.凝膠干燥:可使用聚丙烯-酰胺凝膠干膠裝置室溫快速干燥凝膠，作為記錄保留。

3.本試劑盒僅供科研實驗使用，不得用于食用、臨床醫療等其它用途。

4.實驗操作中，請穿戴好實驗服、防護口置和一次性實驗手套，避免直接接觸，嚴禁入口。

使用該試劑盒發表的文章:

本產品僅供科研，不得用于臨床，醫療，食用等

明膠酶譜檢測試劑盒